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低毒型 Lipo7000 转染试剂,荧光染料在科研中具有的优势及应用

2025-11-13

细胞转染是指将外源分子如 DNA、RNA 等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染技术已成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛。低毒型 Lipo7000 转染试剂 相较于 高效型 Lipo9000 转染试剂 来讲,对细胞毒性更低,更适用于对毒性敏感的细胞转染,适用于把质粒、siRNA 或其它形式的核酸包括 DNA、RNA、寡核苷酸转染到真核细胞中。

低毒型 Lipo7000 转染试剂,其搭配的荧光染料多适配核酸或蛋白标记,结合试剂本身低毒特性,在光学性能、实验适配性等方面优势显著,具体如下:

  • 光学性能优异,检测信号清晰可靠:该试剂适配的荧光染料多具备高荧光量子产率与强吸光能力,像常搭配的近红外类荧光染料,能高效将激发光转化为荧光信号,让低浓度靶标也能产生易识别的信号。同时这类染料光稳定性好,长时间荧光成像或孵育过程中不易发生荧光淬灭,可支撑长时程实验观察。且部分适配染料发射波长处于近红外区,能避开生物样本自身的背景荧光干扰,大幅降低杂信号影响,让检测结果更精准。
  • 兼容性强,适配多场景实验需求:一方面适配细胞类型广,既能高效转染常规贴壁细胞,也能成功将 siRNA、miRNA 等核酸及荧光标记物递送至多种难转染细胞系,配合荧光染料可实现不同细胞类型中靶标分子的检测。另一方面支持多色荧光实验,其适配的荧光染料光谱特性适配性强,可与 FITC、Cy5 等不同荧光标记的探针联用,且光谱重叠少、串扰率低,能满足同时标记检测多个靶标分子的需求,例如同步观察基因表达与细胞活性等。此外还适配高通量实验,可融入自动化检测系统,搭配荧光检测能快速完成大规模药物筛选或基因沉默实验中的信号读取,大幅提升实验效率。
  • 低干扰特性,保障实验真实性:试剂本身低细胞毒性的特点,搭配的荧光染料在工作浓度下也对细胞活性影响极小,不会因染料毒性导致细胞代谢异常或死亡,避免实验结果出现偏差。而且该试剂能以较低的 RNAi 浓度实现高转染效率,对应的荧光染料无需高浓度使用就能达到理想标记效果,减少了高浓度染料可能引发的非特异性结合问题,进一步降低实验干扰,保障基因沉默等实验结果的可靠性。
  • 操作适配性佳,降低实验难度:其搭配的荧光染料无需复杂的预处理流程,可与试剂、核酸等直接混合制备转染复合物,孵育后即可通过常规荧光检测设备观察结果。无需额外添加特殊试剂辅助染料标记或信号增强,简化了实验步骤,同时也减少了因复杂操作引入误差的可能性,尤其适合批量实验或新手操作。

低毒型 Lipo7000 转染试剂,其适配的荧光染料凭借试剂低毒、转染效率高及自身光学性能优异的特点,广泛应用于基因研究、细胞生物学等多个生物医学领域,具体应用如下:

1.基因功能与调控研究:

基因沉默效率检测:该试剂常用于 siRNA、miRNA 介导的基因沉默实验,搭配荧光染料可精准标记靶标基因或其表达产物。比如用荧光染料标记 GAPDH 基因相关探针,转染后通过荧光信号强度变化,能直观评估基因沉默效果,且低毒性可避免细胞异常死亡干扰实验结果,助力明确基因在细胞生长、分化中的功能。

miRNA 调控机制探究:可将荧光标记的 miRNA 与试剂混合转染细胞,借助荧光成像追踪 miRNA 在细胞内的分布位置,观察其与靶基因的结合过程,为研究 miRNA 对细胞信号通路、基因表达的调控机制提供直观的影像依据。

2.细胞生物学多维度研究

细胞增殖与迁移追踪:试剂低毒特性搭配低细胞毒性荧光染料,可对活细胞进行长期标记。在划痕实验或 Transwell 实验中,标记成纤维细胞、肿瘤细胞等,通过荧光信号的动态变化,能实时观察细胞迁移路径和增殖情况,且不会因染料或试剂毒性影响细胞正常生理活动,保障细胞迁移、增殖数据的真实性。

细胞内分子互作观察:适配的荧光染料可用于标记不同蛋白质或核酸分子,该试剂将标记后的分子共同转染细胞后,利用荧光共振能量转移等技术,通过荧光信号的变化判断目标分子间是否存在相互作用及作用强度,例如研究信号通路中蛋白与蛋白的结合关系。

抗体与蛋白标记相关研究该试剂适配的荧光染料可用于抗体、蛋白质等生物分子的标记,转染细胞后能开展免疫化学、荧光原位杂交等实验。例如用荧光染料标记特异性抗体,经试剂辅助转染后,可通过荧光显微镜观察目标蛋白在细胞内的定位,也可与其他荧光探针联用开展多色荧光实验,同步分析多种蛋白或核酸的表达情况,适用于复杂疾病相关的多靶点联合研究。

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