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高强度 RIPA 裂解液(无抑制剂),荧光染料在科研中具有的优势及应用

2025-11-13

高强度 RIPA 裂解液(无抑制剂)可用于裂解细胞/组织,有效提取细胞质、细胞膜及细胞核蛋白,获得的蛋白样品可用于常规的蛋白分析,如 Western Blot、IP 等。本产品的主要成分为 100 mM Tris-HCL (pH 8.0)、150 mM NaCl、1% Triton X-100、1% deoxycholic acid、0.1% SDS 等。

高强度 RIPA 裂解液(无抑制剂)适配的荧光染料,核心优势是兼容性强、标记精准、信号稳定,能高效支撑裂解后蛋白 / 核酸的检测需求,具体如下:

1.兼容性佳,无干扰检测

  • 与裂解液成分(去污剂、盐类等)无相互作用,不会因裂解液环境导致荧光淬灭或非特异性结合。

  • 适配无抑制剂体系,不会与蛋白酶 / 磷酸酶抑制剂等成分冲突,也不影响后续酶促反应或免疫结合实验。

2.标记特异性强,检测精准

  • 可针对性靶向蛋白、核酸或特定修饰位点,如荧光标记抗体仅结合目标蛋白,SYBR Green 特异性嵌入核酸双链。

  • 能区分不同分子量、不同修饰状态的生物分子,助力精准定量与差异分析,避免杂信号干扰结果判读。

3.信号性能优异,支撑多元检测

  • 荧光量子产率高、光稳定性好,标记后信号强度强,可捕捉低丰度蛋白 / 核酸的微弱信号。

  • 发射波长覆盖广(从紫外到近红外),适配多色标记实验,支持同时检测多种目标分子,提升实验效率。

4.操作便捷,适配多场景应用

  • 标记流程简单,无需复杂预处理,可直接与裂解液中的样本孵育,快速完成标记(通常 5-30 分钟)。

  • 兼容 Western blot、免疫荧光、流式细胞术、酶标仪检测等多种实验方法,既能定性观察也能定量分析。

5.适配性广,满足多元需求

  • 可用于细胞、组织等不同来源的裂解样本,适配蛋白定量、互作分析、核酸检测等多种研究目标。

  • 部分染料支持原位标记或活体成像衍生应用,也能适配高通量筛选体系,助力大规模样本分析。

高强度 RIPA 裂解液(无抑制剂)适配的荧光染料,核心用于裂解后蛋白 / 核酸的标记与检测,广泛应用于蛋白组学、分子生物学等科研场景,具体领域如下:

1.蛋白表达与定位研究

  • 蛋白定量检测:搭配荧光染料(如 BCA 荧光定量试剂、荧光素标记抗体),通过荧光信号强度定量裂解液中总蛋白浓度,适配 Western blot、ELISA 等实验的样本归一化。

  • 细胞内蛋白定位分析:用荧光染料标记特异性抗体,对裂解后提取的蛋白进行免疫荧光染色,或结合细胞爬片裂解后的残留结构,观察目标蛋白在细胞内的分布位置。

2.蛋白互作与修饰研究

  • 蛋白 - 蛋白互作检测:借助荧光共振能量转移(FRET)、荧光偏振(FP)技术,用两种不同荧光染料标记候选互作蛋白,通过荧光信号变化判断蛋白间结合能力与相互作用强度。

  • 蛋白修饰(磷酸化、乙酰化等)检测:使用荧光标记的修饰位点特异性抗体,检测裂解液中目标蛋白的修饰状态,分析信号通路激活或调控机制。

3.核酸相关研究

  • 基因组 / 转录组核酸检测:用荧光染料(如 SYBR Green、PicoGreen)标记裂解液中提取的 DNA/RNA,定量核酸浓度与完整性,为 PCR、测序等后续实验提供质控依据。

  • 核酸 - 蛋白结合分析:荧光染料标记 DNA/RNA 探针,与裂解液中的目标蛋白孵育,通过凝胶迁移滞后实验(EMSA)或荧光偏振技术,检测核酸与蛋白的结合特异性。

4.药物研发与高通量筛选

  • 靶向蛋白结合筛选:用荧光染料标记药物分子或蛋白靶点,与裂解液孵育后,通过荧光信号变化筛选能特异性结合靶点的候选药物,评估药物亲和力。

  • 酶活性检测:针对裂解液中的目标酶(如激酶、蛋白酶),用荧光底物类染料,通过酶促反应后荧光信号的释放或增强,定量酶活性,用于酶抑制剂筛选与药效评估。

5.疾病机制与生物标志物研究

  • 疾病相关蛋白检测:从临床样本(组织、细胞)裂解液中,用荧光染料标记的特异性探针,检测疾病相关蛋白(如癌标志物、炎症因子)的表达水平,为疾病诊断与机制研究提供数据。

  • 蛋白差异表达分析:结合双向电泳、荧光差异凝胶电泳(DIGE)技术,用不同荧光染料标记正常与病变样本的裂解液蛋白,筛选差异表达蛋白,挖掘潜在生物标志物。

本文引用地址:https://www.med-life.cn/product/1296639.html

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