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BCA 蛋白定量检测试剂盒,荧光染料在科研中具有的优势及应用

2025-11-14

BCA 蛋白定量检测试剂盒是一种基于二喹啉甲酸 (BCA),利用比色法测定总蛋白浓度的蛋白定量试剂盒。原理为:在碱性介质中,蛋白质可将 Cu2+ 还原成 Cu+。BCA 试剂和亚铜离子整合形成紫色显色物质,在 562 nm 处具有很强的吸光值。利用吸光值和蛋白浓度的线性关系,推算出蛋白浓度。 BCA 蛋白定量检测试剂盒可检测 20~2000 μg/mL 范围的蛋白质浓度且不受绝大部分样品中去污剂等化学物质的影响,如可以兼容样品中高达 5% 的 SDS,5% 的 Triton X-100,5% 的 Tween-20。在测定范围内有良好的线性关系,变异系数小。

BCA 蛋白定量检测试剂盒的荧光染料核心优势是灵敏度高、抗干扰强、操作便捷,能精准高效完成各类样本的蛋白定量,具体如下:

1.灵敏度远超传统比色法,适配低丰度检测

  • 检测范围宽且下限低,常规浓度范围覆盖 0.5 μg/mL–200 μg/mL,部分高灵敏款可低至 0.1 μg/mL,能捕捉低丰度蛋白(如少量细胞裂解液、纯化抗体)的微弱信号。

  • 荧光信号与蛋白浓度线性关系极佳(R2≥0.995),定量结果精准度高,避免传统比色法在低浓度区间的误差放大问题。

2.抗干扰能力强,适配复杂样本

  • 对实验常见杂质耐受性好,如去垢剂(SDS、Triton X-100)、还原剂(DTT、β- 巯基乙醇)、盐类及少量核酸,均不会显著干扰荧光信号。

  • 无需额外去除样本中的杂质,可直接检测细胞裂解液、组织匀浆、血清等复杂样本,简化前处理流程。

3.荧光信号稳定,适配批量检测

  • 染料与蛋白结合后,荧光信号可稳定维持 4–8 小时,无需加急完成检测,便于灵活安排实验节奏。

  • 信号稳定性保障了大规模批量样本(如 96/384 孔板高通量检测)的结果一致性,避免因检测时间差异导致的数据偏差。

4.操作便捷,适配常规设备

  • 仅需将荧光染料工作液与样本按比例混合,37℃孵育 30 分钟即可检测,无需煮沸、离心等复杂步骤。

  • 激发 / 发射波长适配常规荧光酶标仪(约 560 nm 激发、590 nm 发射),无需特殊检测设备,实验室易实现。

5.适配性广,满足多元需求

  • 兼容各类蛋白样本,包括重组蛋白、抗体、胞质蛋白、膜蛋白等,且对不同分子量蛋白的检测变异性小。

  • 既可用于 WB、IP 等实验的样本归一化,也能支撑生物制药中的蛋白质控、临床样本检测等场景,应用灵活。

BCA 蛋白定量检测试剂盒的荧光染料,核心用于各类样本的蛋白精准定量,广泛支撑分子生物学、生物医学、生物制药等多领域的实验质控与分析,具体应用领域如下:

1.基础科研实验质控

  • 样本归一化检测:用于 WB、IP、Co-IP、ELISA 等实验的细胞 / 组织裂解液总蛋白定量,确保上样量一致,避免因蛋白浓度差异导致的实验误差。

  • 蛋白提取与纯化监控:监测细胞破碎、层析分离、亲和纯化等过程中各步骤的蛋白回收率,评估提取或纯化方法的有效性,优化实验流程。

  • 低丰度样本定量:针对少量原代细胞、稀有组织、纯化抗体、重组蛋白等低浓度样本,凭借高灵敏度精准定量,满足珍贵样本的实验需求。

2.生物医学与疾病研究

  • 临床样本蛋白分析:对血清、血浆、脑脊液、肿瘤组织匀浆等临床样本,定量疾病相关蛋白的表达水平,为疾病诊断、分型及机制研究提供数据支撑。

3.高通量与规模化检测

  • 高通量筛选:适配 96/384 孔板和自动化荧光酶标仪,快速定量大规模筛选样本中的靶蛋白浓度,提升筛选效率,支撑研发流程。

  • 大规模样本筛查:用于微生物发酵、植物抗逆研究、细胞库质控等场景的批量样本蛋白定量,满足规模化实验的快速检测需求。

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