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DAB,即 3, 3’-diaminobenzidine 是辣根过氧化物酶 (Peroxidase) 的常用显色底物,在过氧化氢的存在下失去电子而呈现出颜色变化,形成浅棕色不溶性产物,该棕色沉淀不溶于水和乙醇,因此在 DAB 显色后,还可以使用溶于乙醇的染料进行后续染色。
DAB 显色试剂盒(浅棕色)凭借自然温和的显色特性与实用化配方设计,在检测特异性、操作适配性、结果兼容性等维度展现独特优势,尤其适配对显色温和性、背景纯净度有要求的实验场景:
1. 显色温和低背景,高特异性靶标识别
浅棕色显色呈自然柔和色调,与组织 / 细胞的原生底色兼容性强,不易因 “过染” 掩盖细微结构,能精准区分靶标信号与周围组织,特别适合检测分布密集、定位精细的靶标(如细胞内小分子量蛋白、局部富集的抗原)。
背景染色极低,避免常规深色调试剂盒可能出现的非特异性沉淀干扰,在结缔组织丰富、成分复杂的样本(如皮肤、乳腺组织)中,仍能保持靶标信号清晰可辨,结果准确性更高。
显色强度梯度明显,与靶标含量呈良好线性关系,可通过颜色深浅直观判断靶标表达水平,适配半定量分析需求。
2. 操作容错率高,新手易上手
显色反应速度温和,可在 5-30 分钟内灵活调控,即使反应时间稍长也不易出现 “糊片”,相比深色调 DAB 更易控制,降低实验操作误差。
试剂多为预混液滴瓶包装,无需复杂配比,直接滴加即可启动反应,终止时仅需蒸馏水冲洗,无需特殊终止液,操作流程简化,减少实验人员学习成本。
无需严格避光操作,试剂稳定性强,常温短期存放不易失效,适配实验室常规储存条件。
3. 兼容性强,适配多场景实验与后续处理
广泛适配免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)、Western Blot、原位杂交(ISH)等实验,兼容石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片、NC 膜等多种样本类型。
与苏木素核染、特殊组织染色(如 Masson 三色染色)兼容性极佳,浅棕色靶标信号与蓝色核染、其他染色色调形成自然区分,不影响后续复合染色或多重标记分析。
显色沉淀不溶于水和常规脱水剂,样本经脱水、封片后可长期保存,后续可进行二次观察、结果复核或数字化扫描存档,满足学术追溯需求。
4. 成本可控,适配常规实验室需求
仅需普通光学显微镜即可观察成像,无需荧光显微镜、共聚焦等昂贵设备,硬件投入门槛低,适配中小型实验室、基层检测机构或教学场景。
试剂用量省,单张切片或印迹膜仅需少量试剂即可完成显色,且无额外耗材(如滤光片、抗淬灭剂)消耗,长期使用可显著降低实验成本。
5. 低损伤样本,适配珍贵样本检测
浅棕色显色配方对样本组织的损伤更小,尤其适合处理珍贵样本,在保证检测效果的同时,最大程度保留样本完整性,便于后续其他实验分析(如核酸提取、蛋白回收)。
DAB 显色试剂盒(浅棕色)凭借 “低背景、显色温和、兼容性强” 的核心优势,适配对靶标精细定位、样本完整性保护有需求的多领域实验,覆盖基础科研、临床病理、教学等场景:
1. 基础科研领域(核心适配场景)
免疫组织化学(IHC):适配石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片,尤其适合检测分布精细或密集的靶标。
细胞生物学:分析细胞骨架蛋白(如微管蛋白)、信号通路分子(如 PI3K、Akt)的亚细胞定位,浅棕色信号不掩盖细胞器细节;
发育生物学:追踪胚胎组织中特异性抗原的时空表达(如神经嵴细胞标志物),温和显色避免损伤脆弱的胚胎样本;
肿瘤基础研究:检测低丰度肿瘤标志物(如早期癌变相关蛋白),低背景特性减少假阳性干扰,精准反映抗原分布;
神经科学:定位神经元亚群标志物(如 GABA 能神经元、多巴胺能神经元),清晰区分神经纤维与周围组织边界。
免疫细胞化学(ICC):用于贴壁细胞、悬浮细胞涂片的抗原检测,适配细胞表型鉴定、细胞分化状态分析(如干细胞标志物表达),浅棕色信号与细胞自身颜色反差适中,便于显微镜下计数统计。
Western Blot:适配 NC 膜、PVDF 膜上蛋白印迹的显色,浅棕色条带清晰,背景干净,可通过条带深浅半定量分析目的蛋白表达量,适配基础分子生物学的蛋白验证实验。
原位杂交(ISH):结合核酸探针检测 DNA/RNA 的组织定位(如基因原位表达、病毒核酸检测),浅棕色显色与探针信号无干扰,适配基因定位与表达分析。
2. 教学与常规检测场景
高校实验教学:作为生命科学、医学专业的免疫组化、Western Blot 实验教学工具,操作简单、显色直观、容错率高,便于学生观察实验结果、理解免疫检测原理。
基层医疗机构检测:适配基层医院、疾控中心的常规病理筛查(如传染病病原检测、常见肿瘤标志物初筛),无需昂贵设备,成本可控,满足基层检测需求。
畜牧兽医检测:用于动物组织样本的疾病诊断(如畜禽肿瘤、传染病病理分析),兼容动物组织样本的常规处理流程,结果清晰易判读。
3. 其他特色应用场景
样本数字化存档:显色后的样本经扫描后,浅棕色信号在数字化图像中辨识度高,便于建立病理图像数据库,适配远程会诊、学术交流需求。
多重标记辅助实验:在需要进行二次染色或多重标记的实验中,浅棕色显色不影响后续染料的信号识别,适配复杂实验设计的多指标检测。
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